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蛋白酶K 39450

2019-08-10 11:06编辑:admin人气:


使用
蛋白酶K被称为蛋白酶K,因为它可以消化角蛋白。
蛋白酶K家族包括由真菌,酵母和革兰氏阴性细菌分泌的多种细胞内肽酶,细菌分泌的酶具有高度的序列相似性(55%)。
Tritirachium albumLimber分泌的蛋白酶K是该家族的模型蛋白。
蛋白酶K在大多数底物上具有切割活性,但优选含有脂肪族和芳香族烃的肽链。
它属于丝氨酸蛋白酶,具有典型的丝氨酸活性位点:Asp39His69Ser224。
它含有一个含有277个氨基酸位置的肽链,两个二硫键,一个空的半胱氨酸位点和两个钙离子结合位点。
蛋白酶K应用主要在核酸提取过程中消除DNase和RNase,消除基因组结合的组蛋白,也可用于碱性磷酸酶的灭活。
分子生物学技术应用于许多检测标准,例如转基因检测,动物属性检测和病原微生物检测。
分子生物学测定中核酸提取的质量直接影响后续PCR反应的扩增效率。
许多标准已经建立了将蛋白酶K消化添加到核酸提取步骤以提取相对纯的核酸的步骤。
为了保护核酸,分子生物学核酸提取实验通常包括诸如EDTA的试剂。由于EDTA可与金属离子形成络合物,因此酶活性受到影响,通常为pH8。
消化在0和55℃下进行。不同的pH和温度条件影响酶活性。


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